半固体培养法制备非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘蓓蓓

作者： 刘蓓蓓;韦艳娜;陈蓉;谢星;倪博;郝飞;张珍珍;白昀;袁厅;冯志新

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;pA104蛋白;单克隆抗体;半固体培养法

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 682-689

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了快速、高效制备非洲猪瘟病毒（ASFV）单克隆抗体，本研究通过大肠杆菌系统表达并纯化了ASFV重组蛋白pA104R。以ASFV重组蛋白pA104R为抗原，分别比较了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂和常规弗氏佐剂两种免疫策略，并重点比较半固体培养法和常规有限稀释法来制备ASFV pA104R单克隆抗体的效率。结果显示，本研究获得了相对分子质量为3.5×10~4的ASFV重组可溶性蛋白pA104R,通过其与CpG ODN联合氢氧化铝佐剂免疫小鼠，在第21 d即可达到融合要求，本试验方法（重组蛋白pA104R与CpG ODN联合氢氧化铝佐剂免疫）较重组蛋白pA104R与常规弗氏佐剂免疫节省14 d时间。通过半固体培养法筛选单克隆的试验周期比有限稀释法缩短28 d,并减少了亚克隆的工作量。半固体培养法获得5株阳性杂交瘤细胞，挑选效价较高的3株（9A4、9H6、11F5）进行鉴定，重链均为IgG,轻链均为KAPPA。纯化后的3株单克隆抗体针对pA104蛋白和全病毒蛋白质的效价分别达1∶160 000～1∶320 000和1∶200～1∶400。本研究优选了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂结合半固体培养法筛选pA104R的单克隆抗体，为单克隆抗体制备提供了快速高效的新策略。

分类号： S852.651

  • 相关文献

[1]非洲猪瘟病毒p30蛋白的真核表达纯化及单克隆抗体的制备. 刘靖,钟杰,陈伟业,王晗,张经伟,步志高,华荣虹. 2021

[2]非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备及线性抗原表位定位. 魏天,王成宇,王凤杰,李忠鹏,张芳毓,张守峰,扈荣良,吕礼良,王永志. 2022

[3]非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备. 张萌,刘英楠,谢振华,敖清莹,吕璐,于婉琪,金文杰,秦爱建,扈荣良,陈鸿军. 2021

[4]非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 矫健,李建达,韩先杰,张琳,张玉玉,任素芳,刘飞,陈智,Nataliia Hrabchenko,张文娟,于江,吴家强. 2023

[5]非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体制备、鉴定及阻断ELISA方法的建立. 张冯禧,肖琦,朱家平,尹力鸿,赵霞玲,严明帅,徐晋花,温立斌,牛家强,何孔旺. 2022

[6]非洲猪瘟病毒pA104R蛋白单克隆抗体的制备与应用. 王露露,皇甫皓月,席飞,张振江,Weldu Tesfagaber,张纪文,黄炼榆,李芳,步志高,赵东明. 2021

[7]非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 吕璐,钟秋萍,于婉琪,谢振华,张萌,刘英楠,叶建强,秦爱建,扈荣良,陈宗艳,陈鸿军. 2022

[8]非洲猪瘟病毒抗体竞争ELISA检测方法的建立. 李海,宋煜,吴汉,李桂珍,陈纯,李海涛,邵敏,王晓虎,扈荣良,周鹤峰. 2024

[9]非洲猪瘟病毒K205R蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 赵亚茹,韩蓉,杨吉飞,牛庆丽,关贵全,罗建勋,刘光远,殷宏,■,刘志杰. 2019

[10]非洲猪瘟病毒H240R蛋白单克隆抗体的筛选与鉴定. 张宁,丁培阳,任东娜,陈艺兰,李雪洋,常泽杰,李青梅,张改平. 2022

[11]非洲猪瘟病毒pI215L蛋白单克隆抗体的制备及其反应性研究. 许文杰,薛梦迪,张元峰,李长尧,黄丽,熊涛,翁长江. 2021

[12]非洲猪瘟病毒D1133L蛋白单克隆抗体抑制其复制. 闫文倩,侯景,杨金柯,郝,雨,杨行,史喜绢,张大俊,别鑫恬,陈国辉,陈玲玲,何路,赵美玉,赵思越,郑海学,张克山. 2024

[13]双抗体夹心ELISA检测ASFV抗原方法的建立与评价. 李其炫,岳慧贤,蒋依倩,张艳艳,陈腾,王述超,张守峰,扈荣良. 2024

[14]非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA抗体检测方法的建立. 周改静,罗俊聪,石正旺,万颖,杨波,曹丽艳,宋锐,田宏,郑海学. 2022

[15]非洲猪瘟及防控技术研究现状. 扈荣良,于婉琪,陈腾. 2019

[16]非洲猪瘟病毒PCR检测方法的建立. 李云灿,胡剑武,赵俊龙,李家奎. 2021

[17]非洲猪瘟病毒p72蛋白N末端的原核表达及间接ELISA检测方法的建立. 姜林林,宋帅,蔡汝健,蒋智勇,李艳,勾红潮,楚品品,李春玲. 2021

[18]非洲猪瘟病毒锁核酸探针荧光定量PCR检测方法的建立. 李艳,郭怡德,勾红潮,卞志标,孙铭飞,蔡汝健,宋帅,蒋智勇,楚品品,徐民生,杨东霞,李春玲. 2021

[19]非洲猪瘟病毒结构蛋白基因重组痘苗病毒的构建及鉴定. 张会雷,刘任强,张敏敏,王喜军,葛金英,温志远,步志高. 2017

[20]非洲猪瘟病毒蛋白功能研究进展. 郭怡德,李冰,蔡汝健,蒋智勇,宋帅,勾红潮,李艳,楚品品,杨冬霞,卞志标,李春玲,臧莹安. 2020

作者其他论文 更多>>

微信小程序