大草蛉Chrysopa pallens(Rambur)触角cDNA文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王娟

作者： 张礼生;张海平;刘晨曦;王孟卿;陈红印

作者机构：

关键词： 大草蛉;触角;嗅觉;cDNA文库

期刊名称： 环境昆虫学报

ISSN： 1674-0858

年卷期： 2014 年 36 卷 06 期

页码： 898-904

收录情况： 北大核心

摘要： 本文以羽化3天内的大草蛉Chrysopa pallens(Rambur)雌雄触角为材料提取总RNA,以此为模板,通过SMARTscribeTM Reverse Transcriptase反转录酶反转录合成第一链cDNA,引物扩增获得双链cDNA,经CHROMA SPIN+TE-1000 Column分级分离后,收集0.4-2.0 kb之间的片段重组于质粒载体pSMART2IFD并电转化至大肠杆菌Escherichia coli DH5ɑ,最终构建获得大草蛉雌雄触角全长cDNA文库。结果显示构建的雌雄触角cDNA初级文库滴度分别2.1×106pfu/mL和1.8×106pfu/m L,重组率均达到93.0%以上,插入cDNA的片段大小范围为0.4-2.0 kb,主要集中在0.5-1.0 kb,平均长度为549.0 bp,表明构建获得的文库质量较高,可保证大规模全长c NA的获得。该文库的构建丰富了大草蛉基因序列信息,为大量克隆大草蛉嗅觉相关基因,深入揭示大草蛉嗅觉识别机制奠定基础,也为合理利用大草蛉进行生物防治提供理论依据。

分类号： S476.2`Q963

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