诺氟沙星单克隆抗体的制备及其特性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘庆堂

作者： 刘庆堂;职爱民;李青梅;柴书军;赵东;张磊;邓瑞广;张改平

作者机构：

关键词： 诺氟沙星;单克隆抗体;免疫学特性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2010 年 11 卷 09 期

页码： 716-720

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备诺氟沙星单克隆抗体(MAb),用碳二亚胺法将诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)分别偶联于载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA),合成免疫原BSA-NFLX和包被原OVA-NFLX,并用紫外(UV)扫描、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠进行鉴定;用BSA-NFLX免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌NFLX MAb的细胞株,用体内诱生腹水法制备NFLX MAb;对NFLX MAb的效价、敏感性和特异性等特性进行测定。结果表明:NFLX人工抗原制备成功,融合筛选后获得3C6、3G11两株特异敏感的杂交瘤细胞,两株细胞培养上清液效价为1∶512,腹水效价为1∶6.4×105,3C6株对NFLX的IC50为2.52μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03%的交叉反应性,与其他抑制物无交叉反应性。本实验获得了高效价、敏感、特异的抗NFLXMAb,为NFLX残留快速检测方法的建立奠定了基础。

分类号： R392.1

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