康乃馨ACC氧化酶cDNA的克隆及其反义植物表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张树珍

作者： 张树珍;汤火龙;杨本鹏;刘飞虎

作者机构：

关键词： 康乃馨;ACC氧化酶;RT-PCR;反义植物表达载体

期刊名称： 云南植物研究

ISSN： 0253-2700

年卷期： 2002 年 24 卷 06 期

页码： 775-780

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以康乃馨 (DianthuscaryophyllusL .)花瓣为材料 ,用改进的异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,根据已报道的康乃馨ACC氧化酶 (1 aminocyclopropane 1 carboxylicacidoxidase ,ACO)基因的序列设计并合成一对引物 ,通过RT PCR方法获得一约 1 2kb特异片段 ,把该片段连接到pGEM(R) Teasyvector上进行测序 ,其全长共 115 6bp ,编码区 915bp ,共编码 30 4个氨基酸残基。序列分析结果表明该序列与GenBankL35 15 2中的康乃馨ACC氧化酶基因的cDNA序列完全相符 ,推断该基因在康乃馨种内可能是完全或高度保守的。随后将此片段反向插入植物表达载体pBI12 1的 35S启动子和NOS终止子之间 ,构建了一反义植物表达载体pBO ;又把花特异表达启动子PchsA插入pBI12 1的HindIII +Xbal位点构建中间载体pCHB ,再把康乃馨ACC氧化酶基因反向插入中间载体pCHB的XbaI +Sst1位点构建成另一反义植物表达载体pCBO。

分类号： Q943

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