Vero E6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 迟延彬

作者： 迟延彬;石达;朱庆贺;陈建飞;时洪艳;张鑫;李长龙;韩(敷);刘宁

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;Vero E6细胞;cDNA文库;SMART技术;酵母双杂交

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2014 年 41 卷 03 期

页码： 124-127

收录情况： 北大核心

摘要： 为寻找与猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)相互作用的Vero E6细胞蛋白,深入研究病毒感染机制,本试验建立了一个Vero E6细胞酵母杂交cDNA文库。采用Trizol试剂从培养的Vero E6细胞中提取细胞总RNA,通过SMART技术合成双链cDNA,并利用同源重组的方法构建Vero E6细胞的酵母cDNA文库。结果显示,文库滴度为9.7×108 CFU/mL,插入的双链cDNA片段大小为0.5~3kb,平均长度约为1.6kb,文库重组率为87%,此文库可以用来筛选与病毒相互作用的Vero E6蛋白。该文库的构建为发现和研究与PEDV结构蛋白相互作用的宿主细胞蛋白奠定基础。

分类号： Q785`S852.651

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