山羊乳腺特异性表达慢病毒载体的构建与验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朴庆林

作者： 朴庆林;于永生;罗晓彤;金海国

作者机构：

关键词： 人尿激酶原突变体;乳腺特异表达;慢病毒载体

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2009 年 37 卷 31 期

页码： 99-101

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]构建山羊乳腺特异性表达尿激酶原突变体的重组慢病毒载体,证明其表达的有效性。[方法]将劳氏肉瘤病毒增强子/启动子、复制缺陷型艾滋病病毒(HIV-1)的5’端长重复序列(LTR)、HIV-1Ψ包装信号、HIV Rev反应元件、山羊β-casein调控序列、pro-UKM13、ΔU3/3’LTR依次连接,构建乳腺特异性表达的慢病毒载体;通过体外转染人乳腺癌细胞系(MCF-7)、仓鼠卵巢细胞(CHO)和泌乳山羊乳腺注射证明其表达有效性。[结果]构建的山羊乳腺特异性表达载体酶切鉴定是正确的;利用该载体转染细胞,采用溶圈法和Western blot检测证实了其表达的有效性;慢病毒载体注射到泌乳山羊的乳腺,在乳汁中也检测到了尿激酶原的表达。[结论]为在转基因动物的乳腺中表达尿激酶原突变体奠定了基础。

分类号： Q78

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