三疣梭子蟹P-gp蛋白在氟苯尼考代谢中的功能研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐垚

作者： 徐垚;邵慧鑫;高保全;李健;蔡月凤;任宪云

作者机构：

关键词： 三疣梭子蟹;P-糖蛋白;氟苯尼考;转运活性

期刊名称： 海洋渔业

ISSN：

年卷期： 2022 年 005 期

页码： 521-534

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）的P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）的转运功能，利用RACE扩增技术克隆得到abcb1（ATP-binding cassette transporter subfamily b1）基因全长序列，命名为Ptabcb1,cDNA全长为4 923 bp,开放阅读框（ORF）为3 522 bp,编码1 172个氨基酸，具有2个疏水性的跨膜区（TMD）和2个核苷酸结合区（NBD）,符合ABC转运蛋白的基本结构特征。序列比对结果显示，Ptabcb1基因与脊尾白虾（Exopalaemon carinicauda）abcb1基因同源性最高（73.32%）。系统进化树分析表明，Ptabcb1氨基酸序列与脊尾白虾紧密聚为一支。组织表达分布结果显示，Ptabcb1基因在所有组织中均有表达，其中在肝胰腺中的表达量最高。采用荧光原位杂交技术，利用合成目的基因Ptabcb1的杂交探针，通过荧光染色，追踪到Ptabcb1基因主要在肝胰腺的细胞质中表达。利用实时荧光定量技术探究肌注20 mg·kg-1、40 mg·kg-1和80 mg·kg-1不同浓度的氟苯尼考（FLR）对Ptabcb1基因在三疣梭子蟹体内转录表达的影响；以及用10μM维拉帕米（verapamil, VER）注射三疣梭子蟹1 h后，再进行40 mg·kg-1 FLR的注射处理，探究FLR与VER联合注射给药对三疣梭子蟹Ptabcb1基因转录表达的影响以及转运活性的变化。结果显示，FLR在24 h内以浓度依赖的方式，通过促进Ptabcb1基因的转录上调，显著促进PtP-gp蛋白在转录水平上的转运活性；同时发现40 mg·kg-1 FLR与VER联合注射处理组与单独注射40 mg·kg-1 FLR处理组相比，在12 h之内强烈抑制FLR的外排，导致PtP-gp蛋白转运活性降低；12 h之后，PtP-gp蛋白转运活性逐渐恢复到对照组水平。此外，还发现三疣梭子蟹具有保守的P-gp蛋白介导的防御系统。研究结果可为进一步了解P-gp蛋白介导甲壳类动物解毒的分子防御机制提供依据。

分类号： S948

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