草胺膦抗性基因bar的原核表达与蛋白质纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 薄慧杰

作者： 薄慧杰;卢长明;吴刚;武玉花;肖玲;白延红;陈耀锋

作者机构：

关键词： 抗除草剂基因bar;原核表达;蛋白纯化;转基因产品检测

期刊名称： 西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2007 年 35 卷 02 期

页码： 83-87

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过PCR扩增,从pCAMBIA1300-bar质粒中获得bar基因编码区全长,经酶切鉴定和测序后证实,bar基因分离成功。用BamH和Hind酶切,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建成重组质粒pET28bar。将重组质粒pET28 bar转化大肠杆菌菌株BL21(DE3)后,获得高效表达。SDS-PAGE电泳分析显示,目的蛋白主要以包涵体形式存在,蛋白质分子量约为27 ku。将包涵体离心、洗涤和纯化后,得到高纯度的目的蛋白。该蛋白可以替代植物外源蛋白进行转bar基因产品的食用安全性检测,也可用于转bar基因产品ELISA检测的抗体制备。

分类号： Q78

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