人7型腺病毒Hexon蛋白原核表达及蛋白纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 方瑞康

作者： 方瑞康;肖妍;李菁菁;金宁一;鲁会军;李一权;高旭;韩继成

作者机构：

关键词： 人7型腺病毒;Hexon;原核表达;蛋白纯化

期刊名称： 中国病原生物学杂志

ISSN： 1673-5234

年卷期： 2024 年 009 期

页码： 1004-1008

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的 将人7型腺病毒(Human Adenovirus-7,HAdV-7)六邻体蛋白(Hexon)通过原核表达系统进行表达，筛选不同时间、浓度、温度诱导下的最佳表达条件，并进行蛋白纯化研究。方法 通过PCR扩增获得Hexon目的基因，并将目的基因克隆至原核表达载体pET30a(+),构建pET30a-Hexon重组质粒，转化至宿主菌BL21(DE3)。经IPTG诱导表达，筛选蛋白表达条件，利用His标签镍离子蛋白纯化柱纯化蛋白。结果 RT-PCR结果显示可扩增出2 805 bp Hexon目的片段，将Hexon目的基因成功克隆至pET30a(+)载体，转化至BL21(DE3),成功构建pET30a-Hexon重组蛋白；筛选出pET30a-Hexon重组蛋白的最佳表达条件为34℃、1 mmol/L诱导剂诱导8 h,重组蛋白以包涵体的形式进行表达，通过His标签镍离子纯化柱可纯化出目的蛋白。结论 成功表达pET30a-Hexon重组蛋白，筛选出最佳诱导条件并纯化出Hexon目的蛋白，为研究制备单克隆抗体及新型疫苗的开发提供了理论依据。

分类号： R392-33

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