一种简单、快速的苏云金芽胞杆菌基因组DNA提取方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张彦蕊

作者： 束长龙;宋福平;黄大防;张杰

作者机构：

关键词： 苏云金芽胞杆菌;基因组DNA;提取;纯度;PCR;酶切

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2012 年 0 卷 11 期

页码： 197-201

收录情况： 北大核心

摘要： 从培养时间、裂解溶液、抽提和沉淀时间等方面对苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)基因组DNA提取技术进行改进。提取8株对蛴螬有杀虫活性的野生Bt菌株的基因组DNA,分析其纯度,并进行PCR分析与酶切分析。试验结果表明,新的提取方法耗时36 min,明显短于旧方法所用时间(97 min);两种方法提取的基因组DNA A260/A280均大于1.8,无明显区别;琼脂糖凝胶电泳结果显示,上样量相同时,新方法提取的基因组DNA浓度是旧方法的5倍以上;新方法提取的基因组DNA能作为模板灵敏地扩增出测试基因,所提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切,证明DNA具有很高的纯度。本研究改进的基因组DNA提取方法耗时短、产量高,并能满足PCR扩增、酶切等分子生物学需要。

分类号： S476

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