牛分枝杆菌重组蛋白TB27.4的表达、纯化及活性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高新桃

作者： 高新桃;李平俊;鑫婷;贾红;郭晓宇;张改梅;李明;刘淑清;朱鸿飞

作者机构：

关键词： 牛分枝杆菌;TB27.4;表达;纯化;活性鉴定

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2014 年 41 卷 08 期

页码： 61-65

收录情况： 北大核心

摘要： 为探索TB27.4蛋白在牛结核病鉴别诊断中的作用,本试验以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板,PCR扩增tb27.4全长基因片段,将其定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-TB27.4,优化原核表达条件,并用AKTA Purifier对蛋白的纯化条件进行优化。SDS-PAGE结果显示重组蛋白为可溶性表达,且大小与理论值相符,用牛分枝杆菌阳性血清进行Western blotting检测有特异性条带,且可特异性地刺激牛分枝杆菌感染牛外周血淋巴细胞释放大量IFN-γ。结果表明,重组蛋白TB27.4具有良好的B细胞活性和T细胞刺激活性,为进一步研究其在牛结核病诊断中的作用奠定了基础。

分类号： S852.61

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