鲫鱼肝细胞分离与原代培养方法的优化
文献类型: 中文期刊
第一作者: 贾睿
作者: 贾睿;曹丽萍;丁炜东;杜金梁;徐跑;殷国俊
作者机构:
关键词: 鲫鱼;肝细胞;胰蛋白酶;原代培养
期刊名称: 华北农学报
ISSN: 1000-7091
年卷期: 2011 年 26 卷 S2 期
页码: 206-212
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 通过不同的分离方法和培养条件探索鲫鱼肝细胞的原代培养,以建立稳定的鲫鱼肝细胞原代培养模型。用台盼蓝染色检测细胞存活率;用WST-1检测细胞活力,同时观察长期培养过程中肝细胞的形态变化。结果显示:组织块培养4~5 d后肝细胞从组织块中迁出并增殖,但这种方法所需时间长且细胞不易收集;机械分散法收集的细胞少,细胞存活率低;而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的分离和培养效果。用0.1%胰蛋白酶消化30 min,每克肝重可收集1.47×108个细胞,平均存活率为91.43%。培养基和血清浓度均会影响肝细胞的贴壁和生长。在含有10%(V/V)胎牛血清(FCS)M199培养基中,4%CO2、28℃,肝细胞培养8~9 d后传代。
分类号: S917.4
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