金属离子及保护剂对深绿木霉T_(155)产芥子酶的活性影响及芥子酶的分离纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙迪

作者： 孙迪;马艳;安霞;顾志光;王光飞

作者机构：

关键词： 深绿木霉T155;芥子酶;保护剂;电泳;分子量

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2014 年 41 卷 09 期

页码： 1807-1815

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探求金属离子及保护剂对深绿木霉T155产生的粗芥子酶液活性的影响以及芥子酶的分离纯化方法。【方法】通过添加不同浓度的金属离子及保护剂研究对芥子酶活性的影响并通过细胞破壁、硫酸铵沉淀、透析、Sephadex G-100柱层析、DEAE-52离子交换层析、Sephadex G-200柱层析等方法提取到纯的芥子酶,最后通过电泳检测芥子酶的纯度和分子量。【结果】研究发现Ag+、Zn2+、Pb2+、Mg2+、Hg2+、Fe3+等金属离子在低浓度时对芥子酶均表现为一定的促进作用,但达到一定浓度后则起抑制作用,Ca2+浓度在0.069–17.000 g/L范围内均对酶活性起到促进作用,且促进效果基本与Ca2+浓度成正比;添加1 mmol/L EDTA和3 mmol/L DTT对芥子酶的保护作用最好,4°C保存26 d后芥子酶能够保持85%活性;电泳分析该芥子酶的分子量大约在150 kD左右,并且是一个二聚体。【结论】Ca2+在实验浓度内主要是提高芥子酶活性,而其他金属离子对芥子酶活性主要起抑制作用;EDTA或者EDTA与DTT协同能够较好保持芥子酶活性的稳定性;通过一系列分离纯化步骤得到了纯的二聚体芥子酶,研究结果为挖掘产芥子酶的微生物资源提供了新的途径和思路。

分类号： Q936

  • 相关文献

[1]番木瓜果实中芥子酶基因组织差异表达和酶活性研究. 农汉,孙雪飘,谭德冠,付莉莉,张家明. 2011

[2]芥子酶的研究概况. 李定琴,张家明. 2007

[3]酵母表达芥子酶基因TGG4、TGG5的酶学特性差异研究. 吴丽娟,马帅,付莉莉,谭德冠,张家明. 2012

[4]拟南芥硫代葡糖苷酶基因TGG1的克隆、表达和酶学特性. 张盛敏,孙雪飘,张家明. 2010

[5]植物芥子酶研究进展. 庞道标,吴宇佳,谭德冠,李定琴,孙雪飘,张家明. 2007

[6]拟南芥TGG5基因的克隆、表达和酶学特性. 辛曙丽,张家明. 2010

[7]一株深绿木霉产芥子酶酶学性质. 殷蒙,马艳,常志州,陈双林. 2012

[8]植物RNA干涉载体的构建并用于拟南芥芥子酶基因的表达. 吴宇佳,张家明. 2008

[9]番木瓜、萝卜和油菜可溶性和结合型芥子酶活性的比较. 李定琴,张家明. 2009

[10]拟南芥根部芥子酶活性测定条件及其与重组蛋白酶学活性比较研究. 吴丽娟,马帅,付莉莉,孙雪飘,张家明. 2012

[11]拟南芥芥子酶基因TGG4的克隆、表达和酶活性鉴定. 伍祚斌,孙雪飘,汪萌,谭德冠,张家明. 2008

[12]拟南芥芥子酶基因TGG6是花特异表达的假基因. 汪萌,伍祚斌,李定琴,孙雪飘,张家明. 2007

[13]番木瓜芥子酶基因的表达调控和酶活性研究. 李定琴,常凯军,麻琼丽,张家明. 2009

[14]油菜硫代萄葡糖甙分析方法的改进和应用. 彭良才,吴新镛,徐润芳. 1989

[15]蔬菜用药"准、巧、狠". 郭景芬. 2000

[16]德氏乳杆菌保加利亚亚种冷冻干燥活力影响因素的研究. 田丰伟,赵建新,张阿娜,励建荣,陈卫,张灏. 2008

[17]食用菌菌种冷冻保藏用保护剂的筛选. 张志军,李凤美,周永斌,訾惠君,刘连强,乔建军. 2011

[18]ChIFN酿酒酵母工程菌冻干保护剂的优化. 张冬生,刘宗,宋莉,赵德刚. 2018

[19]3种保护剂对60Co-γ射线辐射栀子的保护效应. 刘亮,王丹,王诚,陈红,胡国宇,黎青. 2021

[20]固态微生物菌剂干燥和菌体保存的研究进展. 贺金梅,刘俊轩,孙颖,户天星,王华. 2012

作者其他论文 更多>>

微信小程序