文献类型： 中文期刊
第一作者： 刘金霞
作者： 刘金霞;周艳君;安同庆;仇华吉;王云峰;童光志
作者机构：
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;rtGP2;单克隆抗体
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2006 年 28 卷 06 期
页码： 636-639+644
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株的GP2蛋白基因进行截短修饰后,克隆于pGEX6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS-PAGE分析发现,融合表达的蛋白rtGP2大小约40Ku,Western blot分析证实。表达的融合蛋白rtGP2能被PRRSV阳性血清所特异性识别。收获融合表达的rtGP2,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以表达的融合蛋白rtGP2和GST蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA方法对融合细胞的上清液进行检测,结果获得了1株能稳定分泌抗rtGP2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为26D8,利用PRRSV感染的Marc-145细胞进行间接免疫荧光检测结果发现,所获得的单克隆抗体能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光。亚型鉴定结果显示,该单克隆抗体为IgG1型,其轻链均为K链。本研究中融合表达的rtGP2蛋白及其单克隆抗体的获得,将为今后深入研究PRRSV GP2蛋白的功能与特性提供有益帮助。
分类号： S852.65
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