鸡pro-IL-1β表达、多克隆抗体制备与初步应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 许萌萌

作者: 许萌萌;黄萌萌;牛鑫鑫;王国栋;于航博;张玉龙;韩京哲;韩金泽;刘润杭;吴子文;于晓雪;王笑梅;高玉龙;李留安;祁小乐

作者机构: 天津农学院动物科学与动物医学学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

关键词: 鸡;pro-IL-1β;克隆;表达;多克隆抗体;炎症

期刊名称: 中国家禽

ISSN: 1004-6364

年卷期: 2024 年 46 卷 010 期

页码: 89-96

收录情况: 北大核心

摘要: 为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制,试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β前体(Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β)基因,原核表达和纯化pro-IL-1β蛋白,用纯化的pro-IL-1β蛋白免疫小鼠制备pro-IL-1β多克隆抗体,对该抗体进行ELISA效价检测和鉴定,并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验和Western blot试验中的应用效果。结果显示:重组蛋白pro-IL-1β成功表达,分子量约37 ku,能与His标签抗体发生特异性结合反应;获得了ELISA效价高于1∶32 000的鼠抗pro-IL-1β多克隆抗体,该抗体可通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到pro-IL-1β真核表达蛋白,也可通过Western blot试验检测到pro-IL-1β原核表达蛋白和真核表达蛋白,还可通过Western blot和IFA检测到传染性法氏囊病病毒(IBDV)诱发的巨噬细胞HD11内源性pro-IL-1β蛋白的表达。研究表明,试验成功制备鸡pro-IL-1β多克隆抗体,为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。

分类号: S852.4

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