非洲猪瘟病毒p17蛋白的哺乳动物细胞表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 乔思娜

作者： 乔思娜;赵款;刘佳晨;李国新;童武;周艳君;赵冉;童光志;高飞;李丽薇

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;p17蛋白;293i细胞;多克隆抗体

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 68-73

收录情况： 北大核心

摘要： 研究旨在利用哺乳动物细胞悬浮培养系统表达非洲猪瘟病毒（ASFV）p17蛋白，纯化并免疫小鼠，制备针对ASFV p17蛋白的特异性多克隆抗体。根据GenBank中公布的ASFV SY18毒株p17蛋白编码基因序列，设计特异性引物扩增p17基因片段，构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-p17-strep。将其瞬时转染293i细胞，并利用下游strep标签进行蛋白纯化。纯化后的重组p17蛋白配合MnJ（β）胶体锰佐剂免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体血清。利用Western blot、间接免疫荧光试验鉴定该多克隆抗体的反应原性和特异性。结果显示：本试验成功构建pCDNA3.1-p17-strep真核表达质粒，转染293i细胞后纯化获得重组p17蛋白。免疫小鼠后制备的多克隆抗体与真核表达的p17蛋白及表达ASFV p17蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒均有良好的特异性免疫反应。本试验为深入探讨ASFV p17蛋白的生物学功能奠定了基础。

分类号： S852.651

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