传染性法氏囊病病毒血清2型23/82株VP5蛋白的原核表达及多克隆血清的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 秦立廷

作者： 秦立廷;祁小乐;高宏雷;高玉龙;王笑梅

作者机构：

关键词： 传染性法氏囊病病毒;VP5;原核表达;多克隆血清

期刊名称： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集

ISSN：

年卷期： 2008 年

页码： 4

收录情况： CSCD

摘要： 本实验构建传染性法氏囊病病毒(IBDV)血清2型23/82株非结构蛋白vp5基因的原核表达质粒,在大杆菌中进行了有效表达,并制备多克隆血清。利用EcoRⅠ和XhoⅠ双切PUC57-23/82VP5质粒,获得23/82株vp5基因片段,连接到同样处理的原核表达质粒pET-28a,经酶切鉴定获得重组质粒pET28a-23/82-vP5,转化到宿主BL21(DE3),在IPTG诱导下成功表达融合蛋白,SDS-PAGE和Westernblot表明目的蛋白获得表达,分子量大小为23kDa。利用Ni-NTA柱纯化,复性后免疫8周龄BALB/c小鼠,3次免疫后采血,间接ELISA检测血清抗体效价为1:1...

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