非洲猪瘟病毒p30蛋白氨基酸序列分段表达及反应原性分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 周俊明
作者: 周俊明;倪艳秀;范宝超;祝昊丹;朱雪蛟;王丹丹;胡屹屹;李彬
作者机构:
关键词: 非洲猪瘟病毒;p30蛋白;氨基酸序列片段;反应原性
期刊名称: 江苏农业学报
ISSN: 1000-4440
年卷期: 2024 年 40 卷 010 期
页码: 1875-1881
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)p30蛋白氨基酸序列中不同片段的反应原性,探究p30蛋白氨基酸序列中可能的抗原优势片段。本研究通过PCR、克隆技术将p30蛋白氨基酸序列中不同片段的编码基因分别插入表达质粒pET32a,经IPTG诱导、Ni柱纯化、透析后,获得p30蛋白氨基酸序列中8~101 aa片段(P-1#)、58~101 aa片段(P-2#)、101~158 aa片段(P-3#)、8~194 aa片段(P-4#),用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析p30蛋白氨基酸序列中不同片段与p30蛋白免疫兔血清和ASFV阳性猪血清的反应原性。结果显示,上述片段均获得诱导表达及纯化,表达形式有可溶性表达(P-1#、P-3#)和包涵体表达(P-2#、P-4#)。各片段以1.0 mg/L包被时,p30免疫兔血清与p30蛋白氨基酸序列中4种片段均能发生免疫反应,ASFV阳性猪血清与P-4#、P-1#反应较佳,与P-3#反应中等,与P-2#反应最弱。综上,p30蛋白氨基酸序列中不同片段反应原性的差异为认识p30抗原优势区域提供了数据,这将有助于非洲猪瘟血清学诊断抗原的科学筛选。
分类号: S852.651
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