苦瓜谷氨酰胺合成酶基因(McGS1)原核表达载体的构建及表达分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 申龙斌

作者: 申龙斌;牛玉;刘子记;刘昭华;扬衍

作者机构:

关键词: 苦瓜;谷氨酰胺合成酶;原核表达

期刊名称: 北方园艺

ISSN: 1001-0009

年卷期: 2015 年 22 期

页码: 110-113

收录情况: 北大核心

摘要: 以"热研3号"苦瓜为试材,根据苦瓜谷氨酰胺合成酶基因(McGS1)全长序列信息设计引物,提取"热研3号"苦瓜总RNA并反转录成cDNA作为模板,通过PCR扩增、产物测序、酶切等方法与pET-30a(+)原核表达载体相连,构建苦瓜McGS1基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达分析,研究不同IPTG浓度及诱导时间对苦瓜McGS1基因蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的影响。结果表明:该研究成功构建了苦瓜McGS1基因的原核表达载体,37℃、0.2μmol/L IPTG诱导4h苦瓜McGS1基因蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中可高效表达,表达的蛋白质分子量约为35kDa。

分类号: S642.5

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