绵羊Follistatin基因表达及其结构域的功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张宁

作者： 张宁;张雪梅;刘明军;谭立新

作者机构：

关键词： 绵羊Follistatin基因;原核表达;慢病毒;细胞生长曲线

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2010 年 26 卷 08 期

页码： 1050-1056

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究羊Follistatin基因的功能,提取了绵羊卵巢总RNA,通过RT-PCR方法获得羊FollistatincDNA的完整开放阅读框(1038bp)。去除信号肽序列后与原核表达载体pET41a连接,构建重组表达质粒pFSsig-,经大肠杆菌诱导表达获得FSsig-蛋白(66kDa)。通过RT-PCR克隆了包含N端和结构域1的Follistatin突变体(FSN+D1),将FSN+D1片段插入慢病毒载体(pLEX-MCS)构建了pFS-N+D1慢病毒重组表达质粒。在293T细胞中进行慢病毒的包装,再感染绵羊肌肉原代细胞,得到稳定表达FSN+D1的肌肉细胞系,通过细胞生长曲线结果显示稳定表达FSN+D1的肌肉细胞明显比正常肌肉细胞增殖快,且差异极显著(P<0.01),表明绵羊FSN+D1结构域有促进肌肉细胞生长的功能。

分类号： S826`Q78

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