猪圆环病毒2型Cap基因原核表达载体的构建及表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 范兴琼

作者： 范兴琼;刘成倩;易建中;于宗幸;李红;张倩;余科;章岭

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;衣壳蛋白;原核表达;表达载体;纯化

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 2014 年 30 卷 01 期

页码： 55-59

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank上已发表的PCV2的衣壳蛋白(Cap蛋白)基因设计1对引物,利用PCR方法从已知PCV2病毒中扩增到l条DNA片段,将PCR产物克隆至pMD18-T载体上获得稳定质粒,酶切及测序鉴定后,获得大小为578 bp的Cap基因序列,将该基因插入表达载体pET-30a质粒中,获得重组质粒pET-30a-PCV2-Cap,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。重组质粒pET-30a-PCV2-Cap经IPTG诱导后表达的重组蛋白分子量为28.0kD,经破碎后SDS-PAGE电泳分析表明该蛋白具有可溶性。Western blot分析表明,该重组蛋白与PCV2阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。

分类号： S852.65

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