灰葡萄孢菌激发子pebC1在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张云华

作者： 杨秀芬;刘延锋;玉山江;邱德文

作者机构：

关键词： 激发子;pebC1基因;毕赤酵母;生物活性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2011 年 27 卷 11 期

页码： 96-101

收录情况： 北大核心

摘要： 为了实现激发子PebC1编码基因在毕赤酵母中的分泌表达,采用PCR方法从灰葡萄孢菌BC-4-2-2-1菌株中扩增获得激发子PebC1的编码序列,将其亚克隆至酵母分泌型表达载体pPIC9K中,以此片段构建了pPIC9K-pebC1重组表达质粒。重组表达质粒经BglⅡ线性化处理,电击转化至毕赤酵母宿主菌GS115,经MD、G418-YPD平板和PCR法筛选,获得了重组毕赤酵母菌GS115/pPIC9K-pebC1。用甲醇诱导重组酵母菌表达目标蛋白,发酵液经SDS-PAGE电泳分析,在约39 kDa处出现特异目标条带。Western blotting检测结果说明,重组表达产物具有良好的抗原性。生物活性检测表明,酵母重组表达蛋白PebC1能够诱导拟南芥和黄瓜幼苗对灰霉病的抗性。

分类号： Q78

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