猪圆环病毒3型TB GreenⅡ实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李鹏

作者： 李鹏;孙延举;王寅彪;金前跃;梁晓晓;银梅;王选年;刘兴友;王利平

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒3型;TB GreenⅡ;实时荧光定量PCR;常规PCR;病毒检测

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 135-142

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立猪圆环病毒3型（Porcine circovirus 3,PCV3）快速、灵敏且特异的检测方法，针对PCV3全基因组的保守区域设计特异性引物，构建标准质粒，通过优化反应体系和反应程序，建立基于TB GreenⅡ的实时荧光定量PCR（qPCR）方法，并对其特异性、敏感性、重复性和可行性进行验证。结果显示，建立的TB GreenⅡqPCR检测方法特异性良好，在4.74×102～4.74×107拷贝/μL的标准质粒间具有良好的线性关系（R2=0.999）。建立检测方法的最低检出限为10拷贝/μL，与猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪细小病毒（PPV）和猪圆环病毒2型（PCV2）无交叉反应，组内变异系数为0.33%～0.62%，组间变异系数为0.40%～0.73%。对收集的132份临床样品进行检测，PCV3 TB GreenⅡqPCR方法检出率为9.10%（12/132），高于PCV3常规PCR方法的检出率（4.55%,6/132）。综上，建立的PCV3 TB GreenⅡqPCR检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，可用于临床样品中PCV3感染的诊断、流行病学监测和实验室研究等。

分类号： S852.651

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