密码子优化型鸭甲肝病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李传峰

作者： 李传峰;陈宗艳;孟春春;梁瑞英;胡文;刘光清

作者机构：

关键词： 鸭甲肝病毒;VP1;重组杆状病毒;密码子优化

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2014 年 01 期

页码： 1-8

摘要： 为了提高基因A型鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)VP1基因在昆虫细胞中的表达水平,本研究根据昆虫细胞密码子偏爱性对野生型DHAV VP1(wtVP1)基因进行改造,合成了optiVP1基因,并利用Bac-to-Bac表达系统构建了重组杆状病毒rBacmid-wtVP1和rBacmid-optiVP1,分别转染对数生长期的sf9昆虫细胞表达VP1蛋白。转染72 h后,sf9细胞出现典型的细胞病变(cytopathic effect,CPE),Western-blot和间接免疫荧光法(indirect immunofl uorescence assay,IFA)检测结果表明VP1蛋白在重组杆状病毒感染的sf9昆虫细胞中获得了良好表达。用Image J软件对Western-blot扫描的图片进行灰度分析发现,optiVP1基因在昆虫细胞中的表达水平明显高于wtVP1。本研究为进一步研制诊断抗原和新型基因工程疫苗的开发奠定了基础。

分类号： S852.659.6

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