硼毒害柑橘酵母单杂交文库构建及MIR397上游调控因子筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄镜浩

作者： 黄镜浩;林雄杰;陈木兰;饶文华;和静怡;高芳銮;范国成

作者机构：

关键词： 柑橘;硼毒害;cDNA三框文库;启动子;调控因子

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2025 年 40 卷 003 期

页码： 225-233

摘要： 【目的】以柑橘硼毒害响应关键基因MIR397为切入点筛选上游调控因子，以期为柑橘响应硼毒害的分子网络研究和定向品种改良提供理论参考。【方法】以雪柑（Citrus sinensis）和酸柚（C. grandis）为材料，采用SMART技术构建硼毒害处理叶片的均一化酵母单杂交三框cDNA文库，以硼毒害响应关键基因MIR397启动子中的脱落酸响应元件（Abscisic Acid Response Element, ABRE）、胚乳发育元件（General Control Non-repressed Protein 4,GCN4）、 BoxII-like元件（BoxII-likeCis-actingElement,BoxII-like）和乙烯响应元件（EthyleneResponseElement,ERE）为诱饵筛选上游的调控因子。【结果】所建三框文库容量分别为1.5×106、1.5×106、1.6×106 CFU，外源基因插入片段长度为500～4 000 bp，重组率为100%，初级文库96克隆测序冗余率为0%;cDNA三框表达文库滴度4×109 CFU·mL-1，满足酵母单杂交cDNA文库构建要求。单杂交文库筛选结果获得23条表达序列标签（expressed sequence tag, EST），其中ABRE元件11条、GCN4元件3条、ERE元件9条；60.87%的EST序列与植物的生长发育、逆境响应、信号转导及转录调控相关，17.39%的EST与蛋白质翻译相关，其余被注释的EST为蛋白酶。Y1H点对点验证HAP3、BBX和EIN3与ERE元件存在互作。【结论】本研究通过酵母单杂交文库筛选得到3个与硼毒害响应关键基因MIR397启动子ERE元件存在互作的转录因子，为进一步研究柑橘响应硼毒害的分子网络奠定基础。

分类号： S666

  • 相关文献

[1]猪NOX1基因启动子区转录因子的筛选与鉴定. 汪亮,李忠秋,何鑫淼,王文涛,唐晓东,刘娣,张冬杰. 2021

[2]酵母单杂交文库构建及巨峰葡萄VvFT基因启动子上游调控因子筛选. 黄桂媛,张瑛,林玲,韩佳宇,时晓芳,曹雄军,郭荣荣. 2020

[3]香蕉长链非编码RNA Malnc2310启动子区域分析及上游调控因子筛选. 李文彬,于晓玲,闫羿辰,孙建波. 2023

[4]柑橘CitPG34的克隆、定位与表达分析. 葛廷,黄雪,谢让金. 2019

[5]柑橘CsNCED3-2的克隆及其响应溃疡病菌侵染的表达分析. 谢宇,张庆雯,祁静静,邹修平,何永睿,许兰珍,雷天刚,彭爱红,李强,姚利晓,陈善春,龙琴. 2020

[6]柑橘MAPK基因的生物信息及其响应溃疡病菌侵染的表达分析. 龙琴,谢宇,雷天刚,何永睿,许兰珍,邹修平,陈善春. 2020

[7]柑橘CsTBL1启动子的克隆及其在转基因拟南芥中的活性分析. 陈娇,吴天利,张军,钟广炎. 2014

[8]硼毒害及植物生长调节剂的缓解调控进展. 李嘉欣,宋柏权. 2023

[9]硒对硼毒害下萝卜幼苗生理特性的影响. 袁伟玲,陈卫芳,刘志雄,陈磊夫,吴润. 2024

[10]果实糖代谢及调控因子的研究进展. 于年文,李俊才,王家珍,蔡忠民,沙守峰,李宏军. 2011

[11]植物光信号传导途径中重要调控基因概述. 丁超,张树伟,王新胜,吴霞,杨帆,马纪农,李燕娥,马燕斌. 2015

[12]植物对低温胁迫响应的分子机理. 黄荣峰,杨宇红,王学臣. 2001

[13]哺乳动物毛囊体外培养的研究进展. 南韦肖,张海华,司华哲,李光玉. 2016

[14]番茄心室胶状物的发育及其调控机制. 刘磊,舒金帅,苏龙,李君明. 2017

[15]猪链球菌2型转录调控因子Rex原核表达及体外结合活性分析. 王勇,祝昊丹,何孔旺,范红结. 2017

[16]大穗型和多穗型冬小麦分蘖成穗的调控因子研究进展（英文）. 李娜娜,蒲艳艳,宫永超,李新华,李鹏,丁汉凤. 2015

[17]鱼类性别调控基因cyp19a的研究进展. 宋卓,强俊,朱昊俊,陶易凡,徐跑. 2022

[18]一种玉米CRISPR/Cas9载体的构建. 何春梅,刘铁山,关海英,刘强,董瑞,刘春晓,齐世军,贾熙,汪黎明. 2016

[19]家禽采食量调控机制及主要调控因子研究进展. 孙永波,王亚,萨仁娜,张宏福. 2018

[20]群体感应调控因子ComA对枯草芽胞杆菌NCD-2抑菌物质产生和生物膜形成的影响. 王培培,郭庆港,李社增,鹿秀云,张晓云,马平. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序