4种家兔呼吸道致病菌多重PCR的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 仇汝龙

作者： 仇汝龙;范志宇;胡波;宋艳华;魏后军;陈萌萌;朱伟峰;薛家宾;王芳

作者机构： 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程重点实验室

关键词： 兔呼吸道疾病;多重PCR;铜绿假单胞菌;肺炎克雷伯氏菌;多杀性巴氏杆菌;支气管败血波氏杆菌

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2021 年 010 期

页码： 1958-1962,1969

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立检测家兔铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）、多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida）和支气管败血波氏杆菌（Brodetella bronchiseptica）的多重PCR检测方法,参考GenBank数据库中登录的铜绿假单胞菌gyrA基因、肺炎克雷伯氏菌rcsA基因、多杀性巴氏杆菌KMT1基因和支气管败血波氏杆菌flaA基因,设计4对特异性引物,建立能同时扩增4种家兔呼吸道致病菌核酸的多重PCR检测方法,并进一步对其特异性和敏感性进行检测。特异性检测结果显示,该方法能同时扩增出4种家兔呼吸道致病菌的核酸,而对兔出血症病毒、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌、奇异变形杆菌与肠炎沙门菌无特异性扩增条带,说明该方法特异性良好。敏感性检测结果显示,该方法对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌检测的灵敏度分别为2.5×10-1,2.5×100,2.5×10-2,2.5×10-2μg/L。用建立的多重PCR方法对临床样本进行检测,结果表明,该方法可以快速并且特异地鉴别4种细菌病原的单独或混合感染,与单一PCR检测方法相比无显著性差异（P>0.05）。该方法的建立为家兔呼吸道疾病临床鉴别诊断和4种细菌病原的分离鉴定提供重要的技术手段。

分类号： S858.291

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