转基因抗虫棉花重组DNA在土壤中分布的实时定量PCR分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李刚

作者： 李刚;修伟明;赵建宁;王丽娟;王慧

作者机构：

关键词： 转基因抗虫棉花;重组DNA;实时定量PCR;根盒法;分布

期刊名称： 农业环境科学学报

ISSN： 1672-2043

年卷期： 2012 年 31 卷 10 期

页码： 1933-1940

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据转基因抗虫棉花35S启动子与Cry1A(c)基因以及35S启动子与nptⅡ基因之间的构建特异性序列分别设计引物和探针,建立荧光定量PCR检测方法,并对采集于3个生长时期(播种后40、50d和60d)的不同根区(根表、根际和非根际)土壤中35S-Cry1A和35S-nptⅡ片段进行定量分析。结果表明,所建立的荧光定量PCR方法最低能够检测到10个拷贝数的外源重组DNA片段,定量标准曲线相关系数均达到0.998以上,具有很好的重复性。实时定量PCR分析表明,同一生长时期不同根区土壤中35S-Cry1A和35S-nptⅡ片段拷贝数变化情况均为根表土>根际土>非根际土,即转基因抗虫棉花重组DNA片段主要分布于根表土壤中,其次为根际土壤和非根际土壤。在60d生长期内,土壤中35S-Cry1A和35S-nptⅡ片段的拷贝数随生长时期的推进均呈现上升趋势,其分布范围逐渐扩大。土壤中35S-nptⅡ片段拷贝数均高于同一生长时期相应根区中35S-Cry1A片段的拷贝数。转基因抗虫棉花对环境可能存在潜在影响。

分类号： S562

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