牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张康

作者： 张康;王丹阳;王旭荣;张凯;张景艳;王磊;李建喜

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;5′UTR基因;一步法RT-PCR;诊断

期刊名称： 中国奶牛

ISSN： 1004-4264

年卷期： 2018 年 10 期

页码： 32-35

摘要： 根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了BVDV的RT-PCR检测方法。该方法从BVDV标准毒株NADL中扩增出了279bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞等的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10-1×TCID50。提取9份细胞毒总RNA后,进行一步法RT-PCR扩增可获得一致的检测结果,说明该方法重复性很好。应用该方法对45份临床疑似患牛的样品进行检测,结果检出4份阳性,表明该方法具有较好的临床应用性,且检测结果与参考实验室检测结果完全相符,可用于BVDV的快速诊断。

分类号： S852.653

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