拳卷地钱基因组DNA提取及ISSR-PCR扩增体系优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周雨晴

作者： 杜沛霖;王跃峰;白燕远;朱华

作者机构：

关键词： 拳卷地钱;DNA提取;ISSR-PCR;正交设计;体系优化

期刊名称： 时珍国医国药

ISSN： 1008-0805

年卷期： 2014 年 06 期

页码： 1498-1500

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的建立一种拳卷地钱基因组DNA的提取方法;对影响拳卷地钱ISSR-PCR反应的各因素进行优化,建立稳定的反应体系。方法采用改进的CTAB法提取拳卷地钱基因组DNA;以Taq酶、Mg2+、dNTP和引物4因素3水平的正交设计对拳卷地钱ISSR-PCR反应体系进行优化。结果采用改进的CTAB法提取的拳卷地钱基因组DNA质量高,且适用于ISSR-PCR扩增;获得拳卷地钱最佳反应体系(20μl)为:Taq酶0.5 U,Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 250μmol/L,模板DNA 50ng,引物0.6μmol/L。结论建立并优化了拳卷地钱总DNA提取方法及ISSR-PCR反应体系。

分类号： Q943.2

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