H5亚型禽流感病毒一步法复合RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 包红梅

作者： 包红梅;王秀荣;李一经;陈化兰

作者机构：

关键词： 禽流感病毒;一步法复合RT-PCR;H5N1;亚型鉴别;快速诊断

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2008 年 28 卷 07 期

页码： 804-808

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对近年来H5亚型禽流感(AI)频发的严峻形势,本研究通过分析GenBank中AI的221个HA基因和M基因序列,在保守区内用Oligo4.0软件设计合成2对引物,建立了能同时鉴别AIV型与亚型的一步法复合RT-PCR,其扩增的目的片段大小分别为372、229 bp。通过对AIV尿囊液和棉拭子浸出液进行不同稀释倍数检测,结果病毒在尿囊液最低检出量为10-4稀释。用病毒分离和该方法同时检测不同脏器、口咽及泄殖腔棉拭子样品,结果该方法检测灵敏度比病毒分离低10~100倍。用该方法检测H1~H15亚型AIV和鸡新城疫病毒等其他14种禽病毒,结果所有AIV均有M基因229 bp的目的条带,且仅H5亚型AIV有372 bp的特异性条带,而其他14种禽病毒无任何目的条带。

分类号： S852.65

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