猪瘟病毒实时荧光定量RT-PCR的建立及其对人工感染猪体内猪瘟病毒的检测

文献类型: 中文期刊

第一作者: 赵建军

作者: 赵建军;成丹;李娜;史子学;孙元;赵和平;朱庆虎;涂长春;仇华吉

作者机构:

关键词: 猪瘟病毒;荧光定量RT-PCR;TaqMan荧光探针;RT-nPCR

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2007 年 38 卷 07 期

页码: 685-693

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究应用猪瘟病毒通用引物和野毒特异性TaqMan探针,并以质粒作为阳性标准品,结合Corbett公司的RotorGene3000荧光定量PCR仪,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测猪瘟病毒核酸载量的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。该方法在108~101范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中10拷贝/μL的病毒核酸,与本实验室建立的RT-套式PCR(RT-nPCR)具有相近的敏感性,二者对152份不同样品检测符合率达94.7%。应用本方法对人工感染106TCID50猪瘟石门强毒的猪只感染后0~14 d全血中猪瘟病毒RNA进行了定量检测,揭示了猪瘟病毒在猪体内复制的动态变化,证实了感染猪临床表现与病毒滴度存在明显的时间相关性。此外发现,在同居感染猪出现猪瘟临床症状前3~4 d可从其全血中检出病毒RNA。

分类号: S854.43

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