新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨新艳

作者： 杨新艳;刘培欣;曹殿军;闫丽辉;孙建宏;单文鲁

作者机构：

关键词： DDRT-PCR;新城疫病毒;鸡胚成纤维细胞;基因表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2005 年 27 卷 04 期

页码： 260-263

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 分别以NDVF48E9和LaSota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mR NA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因。主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定。对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列。结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500bp以内的条带,经测序后显示经NDVF48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)_interactingserine_threoninekinase2有47%同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关。

分类号： S852.65

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