表达基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白重组LaSota疫苗株的构建

文献类型: 中文期刊

第一作者: 赵雯

作者: 赵雯;刘瑞菊;孙军峰;刘怀然;韩宗玺;刘胜旺

作者机构:

关键词: 新城疫病毒基因Ⅶ型;F蛋白;裂解位点

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2017 年 39 卷 05 期

页码: 407-411

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)为我国NDV的主要流行病毒株,而经典疫苗株LaSota不能对鸡群起到有效的免疫保护。为研发针对NDV基因Ⅶ型流行病毒株的疫苗,本研究采用反向遗传操作技术,将LaSota的F基因编码区(CDS)替换为基因Ⅶ型流行病毒株CK/CH/LHLJ/1/06株的F基因CDS,并将替换后的F蛋白的裂解位点突变为LaSota的裂解位点,构建重组质粒pNDFLsp-mF。将pNDFLsp-mF与表达NP、P和L蛋白的辅助质粒共转染BSR-T7/5细胞,拯救获得表达基因Ⅶ型NDV F蛋白的重组病毒(rLaSota-mF)。生长曲线结果显示,与LaSota相似,rLaSota-mF能够在鸡胚中有效复制,病毒滴度EID50为109.375/0.1 mL。生物学特性测定结果显示rLaSota-mF的MDT为144.6 h,表明其为低毒力病毒株。将拯救获得的病毒连续传15代后所替换的基因及突变的位点能够在r LaSota-mF中稳定存在。本研究为研究与开发针对NDV不同基因型流行病毒株的疫苗奠定基础。

分类号: S852.65

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