道地药材咸丰白术ISSR反应体系优化及多态性引物筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 卢超

作者： 卢超;何银生;艾伦强;刘海华;周武先;段媛媛;程天周;张美德

作者机构：

关键词： ISSR;道地药材;白术;体系优化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2018 年 22 期

页码： 7423-7428

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了得到适宜的咸丰白术ISSR反应体系,采用两轮U12(62×4)均匀设计的方法,对ISSR反应中各组分设置不同的梯度,分析反应体系各组分用量对扩增结果的影响。结果表明,在18μL的ISSR反应体系中,引物0.29μmol/L,2×Taq Master Mix 9.6μL,模板DNA 47 ng时,扩增条带较清晰,多态性好。根据得到的优化体系,进一步开展白术的引物筛选,并从中得到了9条扩增条带相对清晰稳定、多态性较好的引物。对筛选的多态性引物开展了温度梯度PCR实验,发现温度对ISSR-PCR扩增结果影响显著。本实验通过采用均匀设计的方法,降低了常规体系优化实验所需次数,节省了时间和试剂的用量,为快速建立ISSR反应体系和后续咸丰白术遗传多样性分析提供了便利与帮助。

分类号： S567.233

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