PRRSV细胞受体CD163 SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马小元

作者： 马小元;丁耀忠;王俊;张杰;张永光

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV);CD163;SYBR GreenⅠ;荧光定量RT-PCR;Marc-145细胞

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2017 年 14 期

页码： 108-110+295-296

收录情况： 北大核心

摘要： 为了探索猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)细胞受体CD163在宿主感染PRRSV过程中的表达情况,根据CD163的序列在其保守区设计了1对特异性引物,基于SYBR GreenⅠ荧光染料建立了一步法检测CD163的实时荧光定量RT-PCR(real time RT-PCR)法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验及样品检测试验。结果表明:建立的方法具有较高的特异性,PRRSV的其他几个受体(CD151、HS)均为阴性反应;对CD163的检测下线为10个拷贝数的模板RNA,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对样品进行3次组内和组间重复试验,变异系数(CV)<2%,具有较好的重复性和稳定性;利用该方法对PRRSV感染Marc-145细胞后不同时间段CD163的转录水平进行检测,结果显示CD163在48小时时的mRNA含量明显高于其他各时间段。说明所建立的针对CD163的检测方法完全可以应用于临床样品的检测。

分类号： S852.651

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