柞蚕核型多角体病毒实时荧光LAMP检测方法的初步建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张洋

作者： 张洋;薛强;金英;李凤芹;闫伟

作者机构：

关键词： 柞蚕核型多角体病毒;环介导等温扩增技术;引物;反应条件;早期诊断

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2017 年 06 期

页码： 957-961

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 柞蚕脓病是柞蚕生产上的主要病害之一,病原为柞蚕核型多角体病毒(Ap NPV)。建立快速而准确检测蚕体样品中Ap NPV的技术,将有助于对病害的早期诊断及流行病学调查和实施有效的防控措施。以柞蚕核型多角体病毒ORF142基因为靶基因,设计2组特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,利用实时荧光PCR技术进行检测分析。结果表明,设计与合成的2组引物均能对柞蚕核型多角体病毒基因组扩增出特异性产物,其中引物组2在63℃开始孵育60 min,反应起始扩增时间为12 min,当反应时间达到40 min时,扩增曲线的最大相对荧光强度(RFU)值达6 000,相对于引物组1具有更好的及时性,可缩短一半反应起始时间。初步建立的Ap NPV实时荧光LAMP检测方法相对于传统PCR方法,检测效率提高4倍左右。

分类号： S884.51

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