橡胶树乳管表达HbHMGR1基因双元表达载体构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贺永国

作者： 贺永国;李哲;黄绵佳;曾宪海;林位夫;刘洁琼;张春红;马晓晓

作者机构：

关键词： 橡胶树;乳管特异性启动子PHEV2.1;HbHMGR1基因;植物表达载体;构建;鉴定

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2016 年 47 卷 02 期

页码： 163-168

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】克隆橡胶树乳管特异性强启动子HEV2.1(PHEV2.1),构建天然橡胶生物合成途径关键限速酶基因(Hb HMGR1)的乳管特异性植物表达载体,为橡胶树遗传转化奠定基础。【方法】根据已报道的HEV2.1序列(Gen Bank登录号AY247789.1)设计1对特异引物,采用PCR从橡胶树热研7-33-97基因组DNA中克隆PHEV2.1,与Hb HMGR1基因融合构建橡胶树乳管特异性植物表达载体,并以PCR和限制性内切酶酶切进行鉴定。【结果】用特异引物可从热研7-33-97基因组DNA中扩增获得1852 bp的PHEV2.1片段,其与AY247789.1启动子序列的同源性为98.6%。将PHEV2.1与Hb HMGR1基因融合构建乳管特异性植物表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1,经PCR和限制性内切酶酶切鉴定证明植物表达载体构建成功。【结论】将PHEV2.1和Hb HMGR1基因先构建到p CAMBIA3301载体上再克隆至p CAMBIA2301载体上,能有效解决直接克隆至p CAMBIA2301载体上出现Pst I突变、阻碍载体构建的难题,成功构建获得乳管特异性植物表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1。

分类号： S794.1

  • 相关文献

[1]橡胶树乳管特异性启动子连接HbHMGR1基因的易碎胚性愈伤组织转化. 李哲,贺永国,黄绵佳,曾宪海,林位夫,刘洁琼,张春红,李运合,马晓晓. 2016

[2]橡胶树HbHMGR1基因克隆及其愈伤组织转化. 马晓晓,李哲,戴雪梅,毕政鸿,方家林,黄华孙,李运合,贺永国. 2014

[3]草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白基因植物表达载体的构建. 周勇,范玉顶,徐进,李艳秋,肖艺,曾令兵. 2009

[4]植物表达载体pCAMBIA2301-del-ros的构建及其在草莓上的验证. 金万梅,王华. 2014

[5]小西葫芦黄花叶病毒外壳蛋白基因植物表达载体的构建. 胡京昂,古勤生,刘丽锋,张穗,彭斌,李莉. 2004

[6]山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定. 鞠厚斌,张强,郑海学,施程洪,韩若婵,谢芳,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,朱彩珠,卫广森. 2007

[7]MADS-box基因酵母双杂交系统的构建及鉴定. 刘菊华,徐碧玉,张静,张建斌,贾彩红,金志强. 2011

[8]双效表达载体的构建及其U6启动子的功能效率鉴定. 项海涛,杨彬,温峰琴,胡永浩,柳纪省. 2009

[9]表达小反刍兽疫病毒H基因的山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定. 邵长春,张强,吴国华,颜新敏,李健,王建科,卢晓丽,赵志荀,崔丽凡,高世功. 2009

[10]表达弓形虫TgGRA4重组腺病毒载体的构建及鉴定. 李莉,周博宇,李威,金春梅,于龙政,张厚双. 2022

[11]牛18ku-bFGF基因真核表达载体构建与鉴定. 陈绍红,刘华忠,尚江华,乐小炎. 2012

[12]绵羊肺炎支原体基因组DNA表达文库的构建与鉴定. 陈诚,乔军,孟庆玲,刘田莉,胡政香,马玉,才学鹏,陈创夫. 2016

[13]橡胶树HMGS编码基因的分离鉴定. 邓小敏,陈莹,于洁,杨署光,田维敏. 2018

[14]橡胶树不同品种抗寒性综合鉴定. 莫廷辉,黄俊生,张影波,解辉. 2009

[15]橡胶树红根病病原菌的鉴定. 张运强,张辉强,邓晓东. 1997

[16]一株产铁载体橡胶树拮抗细菌的分离鉴定及耐药性分析. 贺春萍,赵璐璐,孙亮,李锐,梁艳琼,郑肖兰,吴伟怀. 2012

[17]几种橡胶新品系对白粉病的抗性初步评价. 郭刚,黄华孙,张伟算,卓书蝉,郑服丛. 2000

[18]WRKY35转录因子的cDNA克隆与植物表达载体的构建. 伍林涛,杜才富,邵明波. 2010

[19]人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因农杆菌工程菌株的构建. 周鹏,王跃进,贺普超. 2001

[20]小麦avenin-like type-B基因启动子的分离及表达载体的构建. 宋斐,陈泠,孙杨柳,王菲菲,汪越胜,杨广笑,何光源. 2012

作者其他论文 更多>>

微信小程序