昆虫细胞表达兔出血症VP60蛋白间接ELISA方法建立及评价

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘怀然

作者: 刘怀然;曲连东;刘家森;单安山

作者机构:

关键词: 兔出血症病毒;VP60基因;昆虫细胞;间接ELISA

期刊名称: 东北农业大学学报

ISSN:

年卷期: 2010 年 08 期

页码: 81-88

收录情况: CSCD

摘要: 采用Bac-to-Bac系统表达的兔出血症病毒(RHDV)结构蛋白VP60作为包被抗原,建立抗体检测间接ELISA方法,并对方法性能进行测定。试验以整合有VP60基因的重组杆状病毒接种Sf9昆虫细胞,感染细胞经裂解、离心初步纯化,作为包被抗原建立了检测RHD抗体的间接ELISA方法。经过对反应条件和试剂的优化选择,初步组装成间接ELISA试剂盒,并对其整体性能进行了评价。结果表明,含重组VP60蛋白的Sf9细胞裂解液最适包被稀释度为1:2000,换算为纯化VP60蛋白含量约为1.7μg·mL-1;待检血清最适稀释度为1:100;羊抗兔IgGHRP标记抗体最适使用浓度为1:30000。初步组装的...

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