非洲猪瘟病毒LNA引物PCR检测方法的建立及优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李艳

作者： 李艳;张煜轩;楚品品;蒋智勇;席振军;蔡汝健;勾红潮;张昆丽;宋帅;卞志标;李春玲

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;p72基因;LNA引物;PCR检测方法

期刊名称： 中国农学通报

ISSN：

年卷期： 2021 年 029 期

页码： 107-113

收录情况： CSCD

摘要： 为了建立一种便捷、快速且精准的非洲猪瘟病毒的检测方法,本研究根据GenBank中公布的ASFV p72基因序列,设计了一对特异性引物,并对引物中的适当碱基进行锁核酸修饰,通过优化退火温度、引物浓度,建立了非洲猪瘟病毒的锁核酸修饰引物PCR检测方法。结果表明,该方法具有良好的敏感性和特异性,检测灵敏度可以达到3×101copies/uL,比常规引物PCR方法的灵敏度提高了100倍,比real-time PCR方法的灵敏度提高了10倍,对猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒等病原基因组均无扩增,特异性良好。72份临床样品的检测结果与OIE推荐的qPCR方法检测结果一致,符合率为100%。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒的LNA引物PCR检测方法,方法的特异性强、敏感性高,操作简单,为非洲猪瘟病毒的检测提供了一种新的、更加敏感的检测技术。

分类号： S852.65

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