稳定表达T7RNA聚合酶的BHK-21细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 关洪鑫

作者： 关洪鑫;李志勇;高鹏;许生智;白银梅;柳纪省

作者机构：

关键词： T7RNA聚合酶;细胞系;慢病毒表达系统

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN：

年卷期： 2013 年 07 期

页码： 749-753

收录情况： CSCD

摘要： 为了建立能稳定表达T7RNA聚合酶的BHK-21细胞系,利用PCR方法从BL21(DE3)细菌中扩增T7RNA聚合酶基因,并克隆到慢病毒表达系统的pLVX-Puro转移载体上,然后与Lenti-XHTX包装载体共转染Lenti-X293T细胞系,收获高效价的慢病毒。将慢病毒感染BHK-21细胞,用嘌呤霉素多次筛选后获得抗性细胞。用构建的pET-28a-IRES-EGFP检测质粒转染得到的抗性细胞,有荧光表达的细胞即可以稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系。结果表明:构建的BHK-T7株细胞能稳定表达T7RNA聚合酶。

分类号：

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