表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 吴桐忠

作者: 吴桐忠;努尔赛力克·努素甫;黄新;韩猛立;张星星;张倩;王新华;何延华;钟发刚

作者机构: 新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室;新源县农业农村局

关键词: 牛病毒性腹泻病毒(BVDV);E2基因;乳酸乳球菌;免疫原性

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2021 年 008 期

页码: 2975-2981

收录情况: 北大核心

摘要: 试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV) E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E2基因克隆后测序,根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化,再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中,并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞,构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000,经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后,对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛,在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清,用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示,PCR扩增到了1 149 bp的目的片段,乳酸菌密码子偏嗜性优化后,GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符,在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带,与预期蛋白大小一致,且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明,表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应,该重组菌具有较好的免疫原性。

分类号: S852.653

  • 相关文献

[1]表达猪瘟病毒E2蛋白的重组腺病毒的构建及其在兔体内的免疫原性分析. 孙元,祁巧芬,梁冰冰,成丹,李娜,于墨洋,王宇飞,刘霓虹,朱庆虎,仇华吉. 2008

[2]牛病毒性腹泻病毒LN-1株的分离鉴定及基因组序列分析. 刘可欣,王超,张傲,刘佳利,谭斌,张淑琴. 2023

[3]含不同个数基序肽聚糖锚钩蛋白与纳米抗体融合表达对GEM颗粒结合活性的比较. 汪浩,乔绪稳,陈瑾,李图帅,张元鹏,侯继波,郑其升,孙卫东. 2016

[4]ETEC粘附素蛋白亚基Fae G在乳酸乳球菌中的表达及免疫反应性分析. 刘淑杰,李永明,徐子伟,王一成. 2009

[5]磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C基因在乳酸乳球菌中的异源表达. 汤先泽,刘伟,皮雄娥,尹业师,王欣,刘新利. 2016

[6]乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白原核表达载体的构建与表达. 李鹏成,孙冰,乔绪稳,郑其升,侯继波. 2013

[7]乳酸乳球菌和魏斯氏菌的分离及鉴定. 商婷婷,张日俊. 2013

[8]绿色木霉纤维二糖水解酶基因的克隆及其在乳酸菌中的表达与鉴定. 王翠艳,王玉华,朴春红,刘俊梅,胡耀辉,任大勇,于寒松. 2016

[9]表达猪表皮生长因子重组乳酸乳球菌的构建及其对结肠炎模型小鼠肠道损伤的修复作用. 刘淑杰,陶新,邓波,门小明,徐子伟. 2021

[10]乳酸乳球菌K6产Nisin Z的条件优化. 匡珍,李学英,陶乐仁,迟海. 2020

[11]柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA在乳酸乳球菌中的克隆与表达. 张莉,秦泽荣,崔尚金,何召庆,刘尚高. 2006

[12]营养因素对乳酸乳球菌DL-203生长及其Nisin生物合成的影响. 焦中高,陈海昌,刘茵. 2003

[13]表达空肠弯曲菌CfrA蛋白重组乳酸乳球菌的构建及其免疫效果. 王传文,周宏专,郭芳芳,陈玉霞,杨兵,苏霞,朱瑞良,徐福洲. 2016

[14]重组植物甜蛋白马宾灵的食品级乳酸乳球菌诱导表达系统的构建. 顾文亮,夏启玉,姚晶,胡新文,符少萍,郭建春. 2012

[15]固定化乳酸乳球菌DL-203发酵生产Nisin的研究. 焦中高,任平国,徐启宏,刘杰超,陈海昌,刘茵. 2005

[16]牛凝乳酶原基因在食品级乳酸乳球菌中的重组表达. 张艳丽,聂春明,周利伟,张伟,张宇宏,杨晓红. 2013

[17]富含γ-氨基丁酸水牛乳酸奶的研制. 谢芳,杨承剑,唐艳,农皓如,杨攀,曾庆坤. 2015

[18]牛IFN-α基因在食品级乳酸乳球菌中的表达及鉴定. 齐琳琳,张中旺,潘丽,张永光. 2016

[19]牛凝乳酶原基因在食品级乳酸乳球菌中的重组表达. 张艳丽,聂春明,周利伟,张伟,张宇宏,杨晓红. 2014

[20]乳酸乳球菌电转化方法的优化. 于建宁,宋小敬,王公金,潘伟芹,徐小波,于峰祥,李燕. 2013

作者其他论文 更多>>