绒山羊皮肤蛋白双向电泳条件的优化与常见问题分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高丽霞

作者： 高丽霞;刘志红;张燕军;王志新;杜琛;奈日乐;杜立新;李金泉

作者机构：

关键词： 绒山羊;皮肤;蛋白质组;双向电泳;分析

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2014 年 22 卷 02 期

页码： 121-128

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立和优化绒山羊(Capra cashmere)皮肤组织蛋白质双向电泳技术(2-DE),本研究从样品提取及纯化方法、上样量、IPG胶条的选择、等电聚焦程序等多个方面对双向电泳分离条件进行比较研究。结果显示,液氮研磨+超声波破碎法提取皮肤组织蛋白质,2-D clean up kit试剂盒进行纯化,采用17 cm pH4～7的IPG胶条450μg上样量,等电聚焦程序重复数次除盐步骤,获得的2-DE图谱效果较好;同时对实验中遇到的常见问题进行了讨论分析。结果表明,通过优化的双向电泳条件,建立了较高分辨率和较好重复性的绒山羊皮肤组织双向电泳图谱,可以进行后续实验。本研究获得良好的绒山羊皮肤组织蛋白双向电泳图谱,验证了绒山羊蛋白质组学研究的可行性,为后续进行绒山羊皮肤毛囊发育周期蛋白质组学研究、揭示毛囊发生发育规律提供了重要的技术资料。

分类号： S827

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