猪博卡病毒VP2基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李彬

作者： 李彬;杜露平;何孔旺;温立斌;茅爱华;张雪寒;倪艳秀;郭容利;王小敏;周俊明;吕立新;俞正玉;胡屹屹;于洋

作者机构：

关键词： 猪博卡病毒;VP2基因;克隆;原核表达

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2013 年 29 卷 04 期

页码： 796-799

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究猪博卡病毒VP2蛋白的功能及其在疫病诊断中的作用,对其基因进行了克隆和原核表达。根据猪博卡病毒基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了1对引物,采用PCR方法扩增猪博卡病毒的VP2基因,并将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a-VP2,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为49 000的融合蛋白,蛋白质表达量较高,且以可溶性形式存在于菌体中。表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好。Western blot结果显示,表达的VP2蛋白能与His抗体发生特异性免疫反应。说明该试验成功克隆了猪博卡病毒的VP2基因并进行了原核表达,为研究该蛋白的功能及建立血清学诊断方法奠定了基础。

分类号： S852.65

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