鸡传染性贫血病毒VP2基因的原核表达及兔抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙芬芬

作者： 孙芬芬;高玉龙;潘伟;王笑梅

作者机构：

关键词： 鸡传染性贫血病毒(CIAV);VP2蛋白;原核表达;纯化;兔抗血清

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2017 年 17 期

页码： 67-70+291

收录情况： 北大核心

摘要： 为了用大肠杆菌原核表达系统表达鸡传染性贫血病毒(CIAV)VP2基因片段,并制备其兔抗血清,试验以CIAV M9905株基因组DNA为模板,通过PCR扩增VP2基因,与p ET28a(+)载体连接后转化DH5α获得阳性重组子,将其转化E.coli BL21(DE3)菌,IPTG诱导表达出His-VP2重组蛋白,经Ni-NTA树脂纯化后免疫新西兰白兔制备兔抗血清,采用IFA和Western-blot检测该血清的特异性,ELISA测定其效价。结果表明:重组His-VP2融合蛋白的分子质量约为36 ku,以包涵体形式存在。制备的兔抗VP2血清效价在1∶6 400以上,可特异性结合真核表达的VP2蛋白,表明其反应原性较好。说明试验成功表达VP2蛋白,并制备出兔抗血清,可用于该蛋白与病毒其他蛋白之间的相互作用的进一步研究。

分类号： S852.65

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