CIAV VP1 C端基因片段克隆及其在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王英

作者： 王英;王笑梅;高宏雷;付朝阳;张厚双;宋素泉;郭艳

作者机构：

关键词： CIAV;VP1C端基因;表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2004 年 26 卷 06 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将从组织病料中提取到的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到vp1基因,用DNAStar分析软件分析预测VP1的抗原表位,它们主要位于VP1氨基酸序列的第1～95、134～303、327～435位,分别命名为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。欲表达C端基因片段,含部分Ⅱ区和完整的Ⅲ区。把vp1基因克隆到表达载体pGEX＿6p＿1上,用BamHI消化重组表达质粒pGEX＿vp1,回收含C端基因的大片段,自连转化大肠杆菌感受态细胞,得到重组质粒pGEX＿vp1(C)。重组菌经IPTG诱导,SDS＿PAGE分析,结果VP1C端基因片段在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白以包涵体形式存在,分子量约为49kDa。蛋白纯化后作ELISA检测,可与阳性血清反应。本研究为研制应用重组抗原制备ELISA诊断试剂盒奠定了基础。

分类号： S852.6592

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