水貂源犬瘟热病毒的分离及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王小龙

作者： 王小龙;王承宝;王雅文;陈杰;闫喜军;赵建军

作者机构：

关键词： 犬瘟热;犬瘟热病毒;病毒分离;非洲猕猴肾细胞系-Vero/DogSLAM(VDS)细胞;间接免疫荧光;反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2018 年 24 期

页码： 194-197+264

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究当前犬瘟热的流行毒株,试验选取来自辽宁省大连市疑似犬瘟热发病死亡水貂的肺脏、脾脏、肾脏等组织,将研磨匀浆后的上清液接种于稳定表达犬瘟热SLAM受体的非洲猕猴肾细胞系-Vero/DogSLAM(VDS),通过病料的处理、VDS细胞的复苏与培养、病毒的分离与培养、病毒TCID_(50)的测定、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法检测感染细胞中的病毒核酸,用序列比对的方法与已发表的犬瘟热病毒H蛋白(CDV-H)和SLAM受体结合区(RBS)序列进行比对分析,用CDV-H蛋白间接免疫荧光(IFA)的方法检测荧光蛋白表达。结果表明:在Vero/DogSLAM(VDS)细胞上接种病毒培养24 h后,80%～90%的VDS细胞出现合胞体病变(CPE),分离到的病毒TCID_(50)达到1×10~(5. 23)/(100μL),同时检测的CDV-H和SLAM受体结合区(RBS)序列比对分析一致,同源性为98%以上,在细胞质中可观察到抗CDV-H蛋白的特异性绿色荧光,RT-PCR成功扩增出H基因部分片段。说明本试验成功分离并鉴定出1株犬瘟热毒株,将其命名为LNDL(17) M4株。

分类号： S852.65

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