兔出血症病毒VP60蛋白的原核表达及检测方法初步应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘怀然

作者: 刘怀然;胡迎东;陈洪岩;张龄;李昌文;关云涛;曲连东

作者机构:

关键词: 兔出血症病毒;衣壳蛋白;VP60基因;原核表达;诊斯

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2006 年 28 卷 02 期

页码: 201-204

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: VP60是兔出血症病毒(RHDV)的主要结构蛋白,也是免疫原性蛋白,与诱导抗病毒免疫反应直接相关,因而也是检测用首选抗原。本实验在原核系统pPRoEXTMHTa中表达了VP60基因,经SDS-PAGE电泳中可见表达带。Westernblot鉴定结果表明,重组蛋白可被RHD阳性血清特异性识别,具有相应的抗原性。将表达蛋白经SDS-PAGE电泳切胶纯化后免疫BALB/c小鼠,免疫血清经全病毒ELISA检测,效价可达1∶3200~1∶6400,经琼脂扩散试验检测效价为1∶16。重组蛋白纯化、复性后,作为包被抗原初步建立了间接ELISA方法,并检测了48份兔血清样品,与全病毒间接ELSIA试剂盒检测结果相同。实验结果表明,用原核系统表达的VP60蛋白,可以作为RHD新型诊断试剂的候选抗原。

分类号: S858.291

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