牛分枝杆菌融合基因ESAT6-MPB63-HSP65的原核表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郝辉

作者： 郝辉;侯绍华;丁家波;毛开荣;朱鸿飞

作者机构：

关键词： 牛分枝杆菌;融合基因;原核表达;蛋白纯化

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2009 年 36 卷 09 期

页码： 57-60

收录情况： 北大核心

摘要： 以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板,PCR扩增ESAT6、MPB63和HSP65基因,将其依次定向克隆入原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-E6-M63-H65,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1 mmol/L IPTG诱导融合蛋白表达,以Ni2+亲和层析柱纯化表达的融合蛋白并进行Western blotting分析。结果表明,rESAT6-MPB63-HSP65融合蛋白为可溶性表达,且大小与理论值相符,纯化的融合蛋白能够与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应,为进一步的诊断学研究奠定了基础。

分类号： S852.61

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