斑节对虾增殖细胞核抗原基因克隆及表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王成扬

作者： 王成扬;赵超;傅明骏;邱丽华

作者机构：

关键词： 斑节对虾;增殖细胞核抗原(PCNA);卵巢发育;实时荧光定量PCR;5-羟色胺(5-HT);原核表达

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2016 年 23 卷 05 期

页码： 1052-1062

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在斑节对虾(Penaeus monodon)卵巢发育中的功能,利用RACE技术克隆得到了斑节对虾PCNA基因(PmPCNA)的cDNA全长序列。该序列全长978 bp,包括135 bp的5′非编码区(5′UTR)、60 bp的3′UTR和编码260个氨基酸的783 bp的开放阅读框(ORF)。同源性分析结果表明,PmPCNA与其他物种具有很高的蛋白同源性。组织表达模式分析表明,PmPCNA在所监测的各组织中为组成性表达,其中在卵巢和脑中表达量较高;卵巢发育不同阶段基因的表达分析则表明PmPCNA在Ⅲ期表达量最高,是其他各期表达量的2倍;注射五羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)后,PmPCNA在卵巢中表达量明显上升,其中在48 h表达量升高幅度最大,是对照组的5倍左右。利用原核表达技术获得了PCNA的体外重组蛋白,Western Blot分析证实该重组蛋白为PCNA蛋白。以上研究结果表明,PmPCNA蛋白是斑节对虾卵巢发育过程中的重要调节因子,本研究为进一步认识斑节对虾卵巢发育机制提供了基础资料。

分类号： S917.4

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