肝片吸虫天冬酰胺内肽酶的分子特征、遗传进化及抗原特性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张国武

作者： 张国武;孟庆玲;乔军;王熙凤;张凯;宁程程;季春辉;才学鹏

作者机构：

关键词： 肝片吸虫;天冬酰胺内肽酶;分子特征;原核表达;抗原性

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2021 年 010 期

页码： 2289-2294

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】分析肝片吸虫Legumain蛋白的分子特征、遗传进化及抗原性,评估其作为诊断抗原的潜力。【方法】根据GenBank中已发表的肝片吸虫（Fh）Legumain基因序列设计特异性引物,以Fh总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,并将扩增产物克隆到pMD19-T载体中测序,分析其分子特征。将Legumain基因克隆入表达载体pET-32a（+）中,将其转化至Escherichia coli感受态细胞Transetta（DE3）中,IPTG诱导表达并获得纯化的重组蛋白Legumain,进行抗原性分析。【结果】Fh Legumain基因cDNA全长1278 bp,编码425个氨基酸,编码蛋白分子的优势抗原表位主要集中在第73～103、115～137、254～308、319～337、360～375位;1～21位有信号肽,无跨膜区,为亲水性蛋白。【结论】经SDS-PAGE检测,重组Legumain蛋白分子量约为65 kDa,与预期大小相符;Western blot分析表明,重组Legumain可被感染肝片吸虫的绵羊阳性血清特异性识别,证明具有良好的反应原性。小鼠免疫试验证实该蛋白具有良好的免疫原性。

分类号： S855.99

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